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由美國BIOTIUM公司技術專家研發的GelRed 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩定于一身的極佳的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環保局安全認定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環境污染。
與標準凝膠成像系統以及可見光激發的凝膠觀察裝置完美兼容
使用 312nm 激發的 UV 凝膠成像系統時, GelRed 可以完美的替代 EB ;使用 254nm 激發的 UV 凝膠成像系統或可見光激發的凝膠觀察裝置時, GelGreen 足以替代任意一種 SYBR 染料。
Biotium公司的GelRed 和 GelGreen 無論用于預制凝膠染色還是凝膠電泳后染色,都表現出了極高的靈敏度。為配合312 nm UV 凝膠成像系統而設計的 GelRed ,在使用了我們新開發的具有專利的試驗步驟后(該試驗步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳統的 TBE 緩沖溶液),在凝膠電泳后染色中優于或者至少相當于 SYBR Gold 。但與 SYBR Gold不同, GelRed 在預制凝膠中使用時仍然有極高的靈敏度,事實上GelRed 在檢測低濃度、微量 DNA 方面比 EB 表現出更高的靈敏度,尤其對小分子量的 DNA 檢測非常靈敏(圖1)。 GelGreen 可以滿足使用 488 nm 激光凝膠掃描儀或者可見光激發的 Dark Reader 的研究人員的使用要求。 GelGreen 無論是在預制凝膠還是凝膠電泳后染色中都與SYBR Green I 靈敏度相當,但不存在后者的不穩定性問題。實際上, GelRed 和 GelGreen ,特別是 GelRed 非常穩定,可以長期在室溫下保存。當這兩種染料稀釋在 TBE 或者類似的電泳緩沖溶液中時甚至可以使用微波爐加熱,便于采用常規方法制備預制凝膠。含有染料的預制凝膠可以成批制備,長期保存。
同樣重要的是, GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。獨立的測試服務公司( Litron Laboratories, Inc. )進行的標準艾姆斯氏測試結果表明, 在 18.5 μ g /mL (該濃度遠高于推薦用于電泳后染色的 約4 μ g/mL 的 3X 染色液)濃度下, GelGreen 沒有誘變性,而 GelRed 也僅在 S9 代謝活化時有微弱的誘變性。GelRed 和 GelGreen 的特殊化學結構使其難以穿透細胞膜進入細胞,正是這一特性降低了染料的細胞毒性。如圖3。相反, SYBR Green I 廣泛地用于活細胞線粒體和核 DNA 染色,這正是由于它能快速的被細胞吞入。由于已知 SYBR Green I 對紫外線導致的突變有強烈的增強作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),因此它的高細胞膜透性使它在紫外環境觀察時成為凝膠染色的主要有害物質。
GelRed產品來源http://www.wissen-bio.com/