一、適用范圍

黃曲霉B1試劑盒可定性、定量檢測玉米、大米、麥類、豆類、花生、飼料、食用油等樣本中的黃曲霉毒素B1。

二、試驗原理

采用競爭ELISA，在微孔板上預包被黃曲霉毒素B1抗原，加入樣本（或黃曲霉毒素B1標準品溶液）及辣根過氧化物酶標記的黃曲霉毒素B1抗體。樣本或標準品溶液中的黃曲霉毒素B1與預包被在板孔上的黃曲霉毒素B1抗原競爭結合辣根過氧化物酶標記的黃曲霉毒素B1抗體。與樣本或標準品溶液中的黃曲霉毒素B1結合的酶標抗體在洗滌時被除去。再加入TMB顯色液，讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素B1抗原的含量成負相關。對照標準曲線，即可得出相應殘留物黃曲霉毒素B1的含量。

三、注意事項

1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的OD值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會出現標準曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

3. 每加一種試劑前需將其搖勻。

4. 反應終止液為2M鹽酸，避免接觸皮膚。

5. 不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6. 儲存條件：

保存試劑盒于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。保存期：黃曲霉B1試劑盒有效期為12個月。

7. 試劑變質的跡象：

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A_450nm<0.5）時，表示試劑可能變質。

8. 在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為20～30min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到35min（或更長），但不得超過40min。反之，則減短反應時間。

9. 該試劑盒最佳反應溫度為25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。