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霉菌檢測(cè)
霉菌試驗(yàn)是用于檢測(cè)樣品抗霉菌的能力和在有利于霉菌生長(zhǎng)的條件下(即高濕溫暖的環(huán)境中和有無(wú)機(jī)鹽存在的條件下),是否會(huì)受到霉菌的有害影響。
1、培養(yǎng)基選擇
有的菌株即使污染數(shù)量不多,但其產(chǎn)生的霉菌毒素卻危害較大,因此僅作霉菌計(jì)數(shù)并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判斷被污染食品的安全程度。為此,國(guó)外有些研究者設(shè)計(jì)出各類選擇性培養(yǎng)基,可以識(shí)別產(chǎn)毒的霉菌。如AFPA培養(yǎng)基(配方:酵母提取汁20g,蛋白胨10g,檸檬酸鐵銨0.5g,0.2%二氯硝基苯胺1.0ML,瓊脂15g,蒸餾水1000mL,PH5.6)用于分離黃曲霉毒素產(chǎn)生菌高污染率的食品。
2、接種方式
2.1主要有傾注法和涂布法兩種。目前國(guó)際方法中采用傾注法,但近來(lái)國(guó)際上有不少學(xué)者認(rèn)為霉菌計(jì)數(shù)采用涂
2.2對(duì)霉菌計(jì)數(shù)來(lái)說(shuō),涂抹法有以下幾方面優(yōu)越于傾注法:①培養(yǎng)出的霉菌菌落數(shù)較多;
②培養(yǎng)所需的時(shí)間較短;③霉菌孢子、菌落形態(tài)特征發(fā)育完全,便于鑒定。這是因?yàn)榻^大多數(shù)霉菌是好氧的,在培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)快,發(fā)育好,而混在培養(yǎng)基中發(fā)育就受影響,而且在培養(yǎng)基傾注時(shí)霉菌孢子易受熱損傷。布法更合適。
3、培養(yǎng)溫度
3.1大部分菌種的最適溫度為25~30℃。
3.2若有特殊培養(yǎng)目的,則應(yīng)適當(dāng)調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度。
4、培養(yǎng)時(shí)間
如果只要作霉菌計(jì)數(shù),培養(yǎng)3~4天已基本達(dá)到目的,但如果還要進(jìn)一步分類鑒定,則需要培養(yǎng)更長(zhǎng)的時(shí)間(7~14天)。
5、最適計(jì)數(shù)范圍
5.1應(yīng)盡量選擇10~50個(gè)/平皿的稀釋度金相霉菌計(jì)數(shù)。
5.2為控制霉菌的生長(zhǎng)速度和菌落的生長(zhǎng)范圍,可在培養(yǎng)基中添加少量抗生素,如氯霉素(50~100mg/L),金霉素(20~100mg/L),慶大霉素(50mg/L),土霉素(100mg/L)等。
6、霉菌檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)特別注意的事項(xiàng)
6.1由于霉菌檢測(cè)所需要的時(shí)間較長(zhǎng),中間又需要多次觀察,因此實(shí)驗(yàn)前一定要做好實(shí)驗(yàn)計(jì)劃,明確觀察記錄的時(shí)間。
6.2霉菌孢子通過(guò)客氣傳播,應(yīng)保存實(shí)驗(yàn)室平靜,減少空氣流通;所以實(shí)驗(yàn)時(shí)操作時(shí)手腳要快,動(dòng)作要輕,特別是培養(yǎng)過(guò)程中,如果觀察時(shí)動(dòng)作過(guò)大,早期生長(zhǎng)出的霉菌孢子就會(huì)在培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散,形成新的菌落,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。
6.3實(shí)驗(yàn)前應(yīng)認(rèn)真做好全面的消毒工作,包括操作人員手指、實(shí)驗(yàn)室空間、試驗(yàn)臺(tái)等,試驗(yàn)后應(yīng)第一時(shí)間將有霉菌的培養(yǎng)物高壓滅菌,防止進(jìn)一步擴(kuò)散。
6.4對(duì)使用的菌株的生理、生態(tài)、形態(tài)、毒理、致病性必須有充分的了解,并做好相應(yīng)的防擴(kuò)散措施,防止污染其它物品。
7、霉菌控制
7.1利用排氣換氣,減少濕度。
7.2每半月用甲醛熏蒸一次。
7.3保證無(wú)菌室的墻壁、地面、天花板為光滑的材料制成。
7.4二氧化氯3000ppm熏蒸。
7.5食品中霉菌殺滅時(shí)間80℃10分鐘。