中藥血竭含量測定液相色譜儀

血竭又被稱為麒麟竭，具有或xue定痛、化瘀止血、生肌斂瘡的功效，用于跌打損傷、心腹瘀痛、外傷出血、瘡瘍不斂等癥狀。2015年版《中國藥典》一部記載血竭為棕櫚科植物麒麟竭Daemonorops draco Bl.果實滲出的樹脂經(jīng)加工制成。歷史上，作為中藥所使用的血竭是外來品種。在國際市場上血竭主產(chǎn)于印度尼西亞和馬來西亞，又稱為“進(jìn)口血竭”。

《中國藥典》2015版規(guī)定血竭的主要有效成分為血竭素(dracorhodin)，且規(guī)定血竭中血竭素的含量不得低于1%。

作為血竭的功效成分，許多中成藥復(fù)方制劑常以血竭素作為定量指標(biāo)，用于評價制劑工藝及穩(wěn)定性的優(yōu)劣，并制定制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。血竭素定量分析方法有薄層掃描法、高效液相色譜(HPLC)法和導(dǎo)數(shù)光譜法等，而HPLC法以其簡便、可行、結(jié)果可靠得以普遍應(yīng)用。

儀器設(shè)備：潤揚LC-3000A高效液相色譜儀，CXTH3000色譜工作站；Kromasil C18（4.6 mm×250mm,5 μm）HPLC色譜柱；柱溫箱；超聲波清洗器；真空泵；溶劑過濾器；十萬分之一天平。

一、儀器概述
1、血竭檢測液相色譜儀LC-3000A整套系統(tǒng)由P3000二元高壓泵、UV3000檢測器、進(jìn)樣閥、溶劑托盤、色譜柱、工作軟件等組成；安裝、調(diào)試及使用都非常簡單。
2、P3000高壓輸液泵是以CPLD技術(shù)為核心，由單片機(jī)控制的輸液泵系統(tǒng)。全數(shù)字頻率發(fā)生系統(tǒng)，馬達(dá)驅(qū)動系統(tǒng)友好的人機(jī)顯示界面使操作很方便，泵頭及單項閥設(shè)計思路，融匯了當(dāng)今的色譜技術(shù)經(jīng)驗，使該系統(tǒng)在各種條件下都能保證輸液的精度及重復(fù)性。
3、UV3000是一種分光檢測器，可以匹配任何輸液泵，適用于化學(xué)分析、農(nóng)藥、制藥、化工等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。采用了全數(shù)字、高集成化設(shè)計理念，大大降低儀器的噪聲；基于數(shù)字信號傳輸和處理，該檢測器的信號可直接輸入到計算機(jī)的串行口進(jìn)行采集，完全甩掉了傳統(tǒng)儀器必須使用的數(shù)據(jù)采集卡！
二、主要特點
1、P3000系列高壓分析/半制備泵
輸液方式 雙柱塞往復(fù)泵，雙柱塞吸液。
顯示 320X240點陣大屏幕液晶顯示，藍(lán)色背光
系統(tǒng)保護(hù) 慢速啟動，停止，蕞大/蕞小壓力可調(diào)，自動存儲
系統(tǒng)連接 1/8"管路連接
控制 獨立模式 通過前面板的按鍵設(shè)定所有工作參數(shù)。工作于高壓梯度模式時，其中一臺泵為主泵，控制其它相同型號的高壓輸液泵，并可通過屏幕上的梯度曲線對所實現(xiàn)的梯度模式進(jìn)行驗證。
串口模式 通過RS232口，對高壓輸液泵進(jìn)行控制
電源 220V±10％，50Hz，400W
2、UV3000UV/VIS檢測器
控制 獨立模式 通過前面板按鍵
串口模式 通過RS232口軟件控制
顯示 320X240大屏幕液晶顯示，可調(diào)藍(lán)色背光
電源功率 220V±10%，50Hz，60W
外形尺寸及重量398X149X267mm（深X高X寬），14kg

三、儀器配置

1. 方法原理
采用HPLC法測定三聚氰胺，成本低，不需要衍生，簡便易行。采用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。
本方案采用魯創(chuàng)高效液相色譜儀LC-3000二元高壓梯度，按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 22388-2008對牛奶中三聚氰胺進(jìn)行檢測。該方法穩(wěn)定可靠，檢測范圍廣泛。

2. 儀器和試劑
潤揚液相色譜儀LC-3000二元高壓梯度系統(tǒng)：輸液泵，配梯度單元和在線脫氣裝置；LC-3000紫外檢測器；手動進(jìn)樣器7725i，色譜工作站N2000P,離心機(jī)1臺（轉(zhuǎn)頭6*50ml）；固相萃取小柱和萃取裝置；氮吹儀；

溶劑：乙睛（色譜級），甲醇、磷酸、磷酸二氫鈉（分析純）；血蝎素高氯酸鹽；血竭樣品。

色譜條件與系統(tǒng)分析：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以一氫0.05mol／L磷酸二氫鈉溶液(50：50)為流動相；檢測波長為440nm；柱溫40℃。理論板數(shù)按血竭素峰計算應(yīng)不低于4000。

對照品溶液的制備：取血竭素高氯酸鹽對照品9mg，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得(每1ml中含血竭素26μg)(血竭素重量=血竭素高氯酸鹽重量／1.377)。

供試品溶液的制備：取本品適量，研細(xì)，取0.05～0.15g，精密稱定，置具塞試管中，精密加入3％磷酸甲醇溶液10ml，密塞。振搖3分鐘，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

高效液相色譜儀測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。

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