丙烯酰胺ELISA檢測試劑盒

Acrylamide-ES ELISA Test Kit

PN515680

使用之前要閱讀說明書（中文說名書僅供參考請以英文為準(zhǔn)）

1．概述

本產(chǎn)品是高靈敏度的用于定量檢測丙烯酰胺的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒。適用于食物樣品中的丙烯酰胺的檢測。樣品結(jié)果可以用HPLC, GC/MS方法驗證。

2. 安全性說明

試劑盒含有少量的丙烯酰胺；底物中含有四甲基聯(lián)苯胺；終止液中含有稀硫酸，避免皮膚和粘膜接觸終止液；以上各溶劑不小心滴到皮膚上請用水沖洗。

3. 存儲和穩(wěn)定性

存儲：4–8℃

在使用前試劑盒中溶液的溫度要恢復(fù)到室溫(20-25℃)

試劑在有效期內(nèi)都可以使用。

酶標(biāo)記丙烯酰胺是凍干的，使用之前按照所需量用蒸餾水溶解，當(dāng)天使用。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品檢測前需要衍生化并且當(dāng)天使用。

4．原理

此試劑盒是通過丙烯酰胺抗體來檢測丙烯酰胺的。將標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品加入到微孔中和包被在微孔底部的抗丙烯酰胺的高親和力抗體發(fā)生反應(yīng)。如果樣品中存在丙烯酰胺 ，加入HRP（辣根過氧化物酶）標(biāo)記物將競爭性的與抗體結(jié)合。包被在板底部的二抗與抗體結(jié)合，加入洗液洗去未結(jié)合的抗原抗體，加入顯色底物，在酶的作用下顯藍(lán)色。顯色顏色的深淺與樣品中丙烯酰胺的量成反比例關(guān)系。所以，樣品中的丙烯酰胺 濃度越高，顯色的藍(lán)色將會越淺。加入酸，終止反應(yīng)，底物顏色由藍(lán)色變?yōu)樽攸S色。微孔板放進(jìn)酶標(biāo)儀里450nm讀數(shù)，樣品的吸光度值與試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)OD值相比較，相對應(yīng)得出結(jié)果。

5.?丙烯酰胺ELISA 的缺陷

在樣品中出現(xiàn)的很多有機(jī)和無機(jī)物在檢測中是不發(fā)生反應(yīng)的，然而樣品中那些易變性的物質(zhì)產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)是不可以完全避免的。在操作中發(fā)生錯誤也能引起誤差，比如試劑盒的存儲，錯誤的加液順序，試劑加入的量不準(zhǔn)確，在免疫反應(yīng)或底物反應(yīng)中太長或太短的孵育時間，太高或太低的孵育溫度。對于陽性樣品要用液相或質(zhì)譜儀做進(jìn)一步的確認(rèn)。

6．丙烯酰胺測定的重要性

丙烯酰胺是一種常用工業(yè)化學(xué)品，全世界每年大約生產(chǎn)20萬噸。主要用于建筑上的凝膠劑，造紙和土壤調(diào)節(jié)劑，廢水處理的添加劑。丙烯酰胺作為煙中有毒成分之一，對動物生殖系統(tǒng)影響很大。長時間接觸會對人神經(jīng)系統(tǒng)造成損害。除了工業(yè)上用途，丙烯酰胺也是生活中蒸煮的副產(chǎn)物。在超過120°C的燒烤，烘烤，油炸都會引起食物中的天冬氨酸和還原糖如葡萄糖、果糖反應(yīng)產(chǎn)生丙烯酰胺。含較多碳水化合物的食物在經(jīng)過高溫?zé)竞秃婵緯r會產(chǎn)生大量的丙烯酰胺。在生的或煮熟的高碳水化合物食物和肉中沒有發(fā)現(xiàn)丙烯酰胺。Abraxis 丙烯酰胺試劑盒點雙樣的情況下可以檢測40個樣，只需要很少量的樣品，樣品需要進(jìn)行提取和凈化步驟，在檢測前還要進(jìn)行衍生化。